第967章 巨大差距!破解怪病的唯一希望!

许秋这做法,似乎有点不对啊!

常规的抗体提取与纯化办法,是使用proteing柱粗提血清总igg。

这个过程中,抗体亚型分选和聚合体去除其实只能省略。

毕竟这一操作太过繁琐,而且也不是这么简单就能完成分选与去除的。

然而,许秋的方法却截然不同。

段善继甚至看得有些迷糊了。

“你这……做的是什么?”

良久,段善继终于是按捺不住好奇心,咽了下口水后问道。

许秋手中的操作继续。

口里也同步给出了解说:“段教授平日里做的,应该是利用proteing柱粗提血清总igg吧?”

段善继手指颤抖了一下。

听许秋这语气,似乎是要给自己上课了?!

这不对吧?

而一旁的邱伟、张骁等人也是瞪大了眼睛。

等等,不是……这发生了什么!

段教授竟然看不懂许秋的操作目的?

这怎么可能!

众多研究所内的科研人员也赶紧看向操作区。

然而,他们也被许秋那令人眼花缭乱的动作给整晕了,同样是一头的雾水。

事实上,段善继能认出许秋的操作细节,但,却不明白操作目的。

因而此时倒也按下了内心的些许不悦,道:“的确,proteing柱粗提血清总igg是常规手法,你难道有什么创新不成?”

许秋没有回答这个问题。

而是转而提起proteing柱粗提法的缺陷,道:“通过传统粗提取提纯出来的总igg中含有大量非特异性抗体,比如抗食物蛋白抗体,这会直接导致后续交叉反应实验假阳性,导致实验者的严重误判。

“此外,未能够去除的igg聚合体可能通过空间位阻掩盖真实结合位点。

“再者就是,这种情况下,我们没法验证抗体功能活性。即便是部分变性igg丧失结合能力,我们也没法发觉。”

简单来说,就是三点。

一个是不够纯,会导致实验结果不精准。

另一个,是太多影响结合的因素,即便是嗜沫凝聚杆菌与血清结合了,也可能会被遮挡住,难以察觉。

而最后一点,就是实验中出了什么问题导致igg失效甚至是死亡,也没法判断到底是“不结合”,还是“抗体失效”。

这些因素导致的结果是,即便是一路做下来了,最终的elisa信号也可能来自非目标抗体,误判交叉反应存在!

这会严重感染实验结果。

而听完这些,段善继瞳孔微微一缩。

这些问题都真实存在。

但却几乎无解。

许秋能给出这些看法,其实已经说明他的水平相当不低了。

然而……从理论层面找出问题谁都能做到,关键是,根本没法预防啊!

难不成许秋有办法?

想到这,段善继下意识地看向了术区。

此时通过许秋列举的缺点,对许秋的操作步骤进行分析,段善继突然看懂了。

他手指开始颤抖。

嘴皮子也有些哆嗦。

好像……真有用?

不过,邱伟、张骁等人还是一脸的茫然。

而此刻许秋也给出了解释,道:“我对这个方案进行了一定程度的改良。

“首先是预处理。

“我采取了melongel预处理,具体步骤是优先去除白蛋白、转铁蛋白,这两占血清蛋白的百分之九十,通过操作,可以提高igg纯度。

“此外,进行gm1亲和层析,这一方法可以仅保留能结合gm1的igg亚群,而它占总体的比例甚至小于百分之五,聚合体掩盖真实结合位点的概率会大大降低。

“最后就是sec去除聚合体,而它能够确保单体igg占比大于百分之九十五。”

随后,许秋一一讲解了操作的细节。

包括各种关键步骤如何处理。

很快,所有人脸上的表情就被惊骇所覆盖了。

其中段善继是最为震撼了。

按照他的预估,用许秋的改良方案进行处理后,特异性能提升三四倍。

而且,经过许秋层析后的单体igg能够有效避免空间位阻,真实反映表位结合能力!

段善继突然有点手痒了。

他忍不住在旁边也做了一个常规方法的抗体提取与纯化。

想要通过对比,看看许秋的方法优势究竟有多大。

不过,说实话,段善继还是很有自信的。

尽管都是常规方法,但段善继手法娴熟,极为专业。

对细节的把控几乎可以说做到了极点。

仅仅是普通的粗提操作,就做得赏心悦目,让邱伟等人都感觉眼前一亮。

很快,段善继也结束了抗体提取与纯化。

随后他迫不及待地将自己的结果与许秋的结果进行对比。

但,令他吃惊的一幕出现了——通过数据对比:自己采取的常规方法,igg与gm1结合od值仅仅只有12。

而许秋处理过的,od值却飙升至35!

所谓od值,其实就是光密度,它经常被用于表示被检测物吸收掉的光密度,通常可以代表测定物质的含量。

而且,被检测物浓度越高,吸光度的值就会越高。

放在这个病例上面。

相同的血清,一致的嗜沫凝聚杆菌菌种,结合od值越大,越能标志着igg与gm1结合,则效果越好。

按理说,两者的结合od值应该不会相差太大。

然而事实上却是,许秋的改良方案,od值几乎是段善继的一点五倍了!

但最令人诧异的还不是这个。

而是……病人的竞争抑制率。

段善继处理过后的样本,竞争抑制率差不多在百分之四十左右。

而许秋,却达到了百分之九十二……

这意味着,粗提igg中存在大量干扰抗体,导致竞争抑制率大幅度降低,严重干扰了实验结果!

“怎么会差距这么大!”

段善继有点难以理解了。

他知道许秋的改良方案算是不错了。

但眼下,直观的数据却给了他一个冷冰冰的答案——他与许秋差得太远!

这一刻,段善继突然有点没法接受了。

到底……谁才是科研大佬,谁才是神经免疫学专家来着?

“还行,还行。你继续。”

段善继默默地盖上了对比数据,嘴角抽搐地说了一句。

许秋倒也没追问。

他并不在乎对比结果。

相比之下,专注于自己内心已经定下的实验方案,才是最重要的。

毕竟如今最有可能在三天之内破开彭月娇怪病真相的,就是自己了。